ทางหลวงสายนี้มีจุดเริ่มต้นในทางทิศใต้ที่ บ้านอู่ยา ตำบลดอนกำยาน อำเภอเมืองสุพรรณบุรี โดยมีเส้นทางต่อมาจาก ทางหลวงแผ่นดินหมายเลข 321 เส้นทางขึ้นไปทางทิศเหนือ จากนั้นโค้งไปทางทิศตะวันตก ผ่านตำบลบ้านโพธิ์ ตัดกับ ถนนวงแหวนรอบเมืองสุพรรณบุรี ฝั่งตะวันตก ผ่าน ตำบลสระแก้ว แล้วเลี้ยวไปทางทิศเหนือ ผ่าน ตำบลสนามคลี ตำบลตลิ่งชัน แล้วเข้าสู่ อำเภอดอนเจดีย์ ผ่าน ตำบลไร่รถ และสิ้นสุดที่ ตำบลดอนเจดีย์ บนถนนเลียบคูเมืองดอนเจดีย์ บริเวณมุมคูเมืองฝั่งทิศตะวันตกเฉียงใต้ หากเลี้ยวซ้ายก็จะสามารถเชื่อมต่อกับ ทางหลวงแผ่นดินหมายเลข 3038 ได้