สโมสรผึ้งน้อยมีสมาชิกที่เป็นเด็กๆทั่วประเทศ โดยมีการการเปิดรับสมัครสมาชิก ทั้งที่เป็นสมาชิกทางบ้าน และสมาชิกประจำ โดยสมาชิกทุกคนจะมีบัตรสมาชิกให้ และสมาชิกของสโมสรผึ้งน้อย จะถูกเรียกกันโดยมีคำว่า "ผึ้งน้อย" นำหน้า เช่น ผึ้งน้อยอั๋น ผึ้งน้อยต่อ ผึ้งน้อยโบว์ หรือผึ้งน้อยจอย ส่วนที่เป็นสมาชิกทางบ้าน เด็กๆจะเขียนจดหมายเข้ามาสมัครที่รายการ ส่วนที่เป็นสมาชิกประจำจะเป็นเด็กๆที่เข้ามาสมัครที่รายการด้วยตัวเอง และจะต้องผ่านการคัดเลือกจากทีมงานของรายการเสียก่อน ว่ามีความสามารถจริงในการแสดงออก เด็กๆที่เป็นสมาชิกประจำของสโมสรผึ้งน้อยเหล่านี้ จึงมักจะได้รับการเชื้อเชิญให้เป็นนักร้อง นักแสดงในโฆษณา ภาพยนตร์ และละครต่างๆหลายเรื่อง เช่นแก๊งค์ไอติม จอมเกเร เป็นต้น