รายการมาสเตอร์คีย์ได้มีการปรับเปลี่ยนพิธีกรมาหลายต่อหลายรุ่น ดังนี้

ผู้ดำเนินรายการปัจจุบัน

• เมทนี บุรณศิริ (2537 - ปัจจุบัน)

ผู้ดำเนินรายการในอดีต

• เทพ โพธิ์งาม (2537 - 2553)
• ญาสุมินทร์ เลิศอมรวัฒนา (2537 - 2550)
• วิทยา เจตะภัย (ถนอม 3 โทน)(2545 - 2550)
• ณวัญญู ภูวัฒนา (2553)
• แจ็ค เชิญยิ้ม (2553 - 4 มีนาคม พ.ศ. 2554)
• ดารัณ ฐิตะกวิน (15 มีนาคม 2553 - 4 มีนาคม พ.ศ. 2554)
• แจ๊ส ชวนชื่น (2553 - 4 มีนาคม พ.ศ. 2554)

ตัวแทนของผู้ดำเนินรายการ

ในกรณีที่ผู้ดำเนินรายการร่วมคนใดคนหนึ่งติดภารกิจจนไม่สามารถดำเนินรายการ ได้เช่น ลาป่วย หรือ ติดธุระส่วนตัวเป็นต้น ก็จะมีตัวแทนของผู้ดำเนินรายการร่วมมาทำหน้าที่เป็นผู้ร่วมดำเนินรายการ

• น้อย โพธิ์งาม แทน เทพ โพธิ์งาม ติดภารกิจ (2537)
• แดนนี่ ศรีภิญโญ แทน เทพ โพธิ์งาม ติดภารกิจ (2541)
• เด๋อ ดอกสะเดา แทน เทพ โพธิ์งาม ติดภารกิจ (2542)
• วรุฒ วรธรรม แทน เมทนี บุรณศิริ ติดภารกิจ (24 - 28 กรกฎาคม พ.ศ. 2543)