โบสถ์พระคูหาศักดิ์สิทธิ์ (อังกฤษ: Church of the Holy Sepulchre; ละติน: Ecclesia Sancti Sepulchri; อาหรับ: كنيسة القيامة‎, Kanīsat al-Qiyāmah; ฮีบรู: כנסיית הקבר‎, Knesiyat ha-Kever) หรือที่คริสตชนออร์ทอดอกซ์เรียกว่า โบสถ์การคืนพระชนม์ หรือ โบสถ์แห่งอะนาสตาซิส (กรีก: Ναός της Αναστάσεως Naos tes Anastaseos) เป็นโบสถ์ในย่านชุมชนคริสเตียนของเมืองเยรูซาเลมเก่า ตัวโบสถ์ถูกสร้างขึ้นบนสถานที่สองแห่งที่ชาวคริสเตียนถือว่าศักดิ์สิทธิ์มากที่สุด คือ สถานที่ทำการตรึงพระเยซูที่กางเขน ซึ่งมีชื่อเรียกว่า โกละโกธา (ภาษากรีกในพระคัมภีร์: Γολγοθᾶ) และพระคูหาว่างเปล่าที่พระองค์ถูกฝัง และฟื้นคืนพระชนม์